Diagnóstico molecular e tipagem do vírus da Dengue;
RT-PCR e tipagem do vírus da Dengue; Pesquisa para Dengue
Instruções
Este exame deverá ser realizado preferencialmente nos primeiros 5 dias de evolução dos sintomas clínicos.
Após este período, devido à diminuição da viremia, pode ocorrer a não detecção de cópias virais, impossibilitando a tipagem do vírus.
Jejum
Não é necessário.
Condições
Soro.
Coleta
Soro (congelado):
O sangue deve ser colhido em tubo a vácuo (com ou sem gel separador) e após centrifugação transferir o soro assepticamente (com pipeta estéril ou virgem) para o tubo de transporte.
Congelar imediatamente após fracionamento.
Não enviar em tubo tipo Eppendorf.
Volume Mínimo
0,5 mL.
Volume Recomendável
1,0 mL.
Critérios de Rejeição
Amostras não congeladas.
Comentários
O vírus dengue é classificado como um arbovírus mantendo-se na natureza pela multiplicação em mosquitos hematófagos do gênero Aedes. Pertence a família Flaviviridae, existem quatro sorotipos: DENV-1, DENV-2, DENV-3 e DENV-4. Eles são antigenicamente diferentes e não induzem proteção imunológica cruzada, mas podem causar tanto a forma clássica da doença quanto formas mais graves, comum na reinfecção. Atualmente, os quatro sorotipos encontram-se presentes em todos os estados brasileiros, contribuindo para incidência das formas graves da doença. A confirmação do diagnóstico de dengue pode ser realizado através de exames sorológicos ( pesquisa de IgM e IgG), detecção e tipagem do vírus da dengue através da Reação em Cadeia da Polimerase em Tempo Real (RT-PCR). O ensaio da RT-PCR amplifica quatro regiões específicas para o sorotipo: dengue 1 (gene NS5), dengue 2 (gene NS3), dengue 3 (gene NS5) e dengue 4 (gene do capsídeo)e utiliza primers especificos fluorescentes bifuncionais. Todo o processo é monitorado por um controle interno de RNA.
Uma das vantagens da RT-PCR é a detecção e sorotipagem precoce do vírus, antes mesmo da soroconversão
